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大豆有效成分提取及新型蛋白质加工技术研究

中华园林网  2006-11-19    

-------------------------------------------------------------------------------- 一、计划任务及考核目标 (一)大豆有效成分提取加工技术研究 筛选出适合提取SOD的大豆(豆类)原料;研究提取大豆SOD的工艺;研 究选择大豆SOD的检测方法;研究大豆SOD的应用方法。大豆复合物SOD 的 活性定为30~50um/ml,或大豆SOD精品为1000~3000um/mg;大豆SOD 的理化指标和卫生指标符合国家规定;中试生产大豆SOD复合物50kg。 (二)吉林酸豆奶研究 选择适合做酸豆奶的原料品种,确定最佳发芽时期,筛选和组合乳酸 菌群,确定发酵温度和冷却办法。制成无豆腥味、酸甜适中、组织细腻的 酸豆奶,活菌数达到106~109个/ml。 筛选乳酸菌种,确定最佳发芽期。完成菌种认证和酸奶理化、卫生指 标检测。组建中试室,达到每次生产1000瓶规模。 (三)高效价蛋白食品技术研究 选育耐高温菌种。以大豆或豆渣为原料,通过少胞根霉的转化,研制 高蛋白食品。 选育出耐高温菌种。研制出高蛋白食品,粗蛋白得率大于55%,消化 吸收率大于67%。 (四)利用微生态益菌发酵大豆粉提取SOD研究 研究大豆粉在培养基中的比重对微生态益菌SOD产量的影响。 研究不 同温度、pH值、通氧量及金属离子加入量对益生态菌SOD产量的影响。 完 成SOD层析纯化流程研究,研究不同破碎方法对菌细胞SOD活性和提取量的 影响及去除杂蛋白的方法研究。研究S OD活性保持技术,研究层析提取技 术及半衰期,确定减少影响SOD活性方法。 从微生物资源中筛选出高SOD含量菌株3~4株,每克菌SOD活性指标达 650um(NBT法)。完成SO D中试,生产出 SOD 纯酶水剂, 活性为 1000 ~ 3000um/ml;粉剂1 g,活性为3000~5000um/ml。 二、计划完成情况 (一)大豆有效成份提取加工技术研究 从140多个大豆品种中筛选出3个SOD含量较高、易提取的品种。 采用 中药制剂的方法提取SOD。提取的大豆SOD,辅以“药食同源”中药,制成 保健型大豆SOD口服液,经动物试验证明具有抗疲劳、抗衰老, 抗炎和提 高血液中SOD活性等功能。确定“NBT”法为检测大豆SOD的主要方法。 经 解放军301医院检测,大豆SOD口服液的SOD活性为162.3um/ml,保存半 年以上的大豆SOD口服液的活性为108.9um/ml;大豆SOD精品SOD 的活 性为190um/ml。 解决的关键技术 确定了NBT法(核黄素系统)为大豆SOD 的主要测活 方法,对该方法的各个环节都进行了仔细的探索和反复试验,制定了一套 适合检测大豆SOD活性的程序和方法,使用该方法检测大豆SOD的活性结果 比较稳定。研究了一套适宜制备大豆SOD的工艺方法,解决了用动物血SOD 提取方法制备大豆SOD的成本高、得率低的问题,用该工艺提取大豆SOD活 性提高50%以上。用中药制剂处理大豆SOD复合液,消除了大豆SOD复合液 中的绝大部分胰蛋白酶抑制剂。大豆制品中的胰蛋白酶抑制剂降低肠内胰 蛋白酶的有效活性,对胰腺分泌水平反馈抑制,对人体产生危害,传统加 热消降胰蛋白酶抑制剂的方法,使大豆SOD全部失活。 该研究采用中药制 剂消除胰蛋白酶抑制剂,同时保留了大豆SOD活性。大豆SOD与动物血 SOD 一样,是一种生物活性不稳定的酶,在自然条件下存放很容易失活,延长 产品的货架期是生产SOD制品的关键,我们制成的大豆SOD复合液,在室温 和自然光照条件下存放六个月,SOD活性损失不超过50%。 大豆SOD提取技术和大豆SOD口服液经世界联机检索和国内文献检索证 明,属世界首创,大豆SOD口服液经动物试验表明, 具有明显的抗炎性, 抗疲劳、抗衰老功能,给予12小时内血液中SOD活性增高。 (二)吉林酸豆奶研究 选择大豆高产品种为原料,最佳发芽期为芽长1cm。 选择保加利亚 杆菌等混合菌群为发酵剂,该发酵剂需前期驯化。以发芽大豆为原料,辅 之以少量奶粉、糖等辅料作发酵底物,加入发酵剂后发酵,经过物理、化 学和生物学综合方法处理,消除大豆有害因子和豆腥味。产品组织细腻, 呈乳白色,凝乳性佳,酸甜适口。含有丰富的氨基酸和矿物质。尤其该产 品含有丰富的SOD,能起到消除疲劳、抗衰老、抗炎的保健作用。 其中含 活菌数达到106/ ml以上。 完成产品的理化、 卫生指标检测, 符合 GB2746-81标准。组建了中试室,其中发芽室6m3,发酵室12m3。每 次可以生产1000瓶以上。1991年8月向国家专利局申报了专利,1992年1月 公开。 解决的关键技术 筛选了适合豆芽酸奶制作的菌种。确定了作原料的 品种和发芽时期。确定了最佳底物配方。 (三)高效价蛋白食品技术研究 筛选、分离和鉴定了特定菌种RT-3。制成了风味较好的丹贝系列食品。 丹贝蛋白含量(干基)为54.1%。丹贝蛋白消化率为94.35%。 原料利用率 为80%,蛋白质得率为90%。 解决的关键技术 选育出耐高温菌种RT-3,经认定是少胞根霉,能适 合丹贝发酵的基质高温条件。研制出新型菌丝型发酵剂,解决了丹贝规模 生产时对发酵剂的要求。按规定程序对丹贝进行了系统的安全研究。并证 明安全无害。首次发现丹贝异黄酮及其生物活性,并建立丹贝异黄酮的快 速检测法。采用高温短时灭菌工序有效抑制了丹贝后加工过程中的品质劣 化问题。研究结果初步表明,发酵过程中随菌丝的生长,分泌超氧化物歧 化酶(SOD),其效价达700um/g样品,关于少胞根霉产生超氧化物歧化酶还 是第一次报告。 (四)利用微生态益菌发酵大豆提取SOD研究 已筛选菌株4个(活性达650u/g菌)。确定了大豆发酵底物配方,大豆 粉量为1.5%~3%。完成了提取工艺,得精品5g,活性为3800~4000um /mg 在樱桃、草霉、苹果、桃上进行了SOD应用试验,可以提高果实SOD含 量15%~20%。 解决的技术关键 筛选了理想的菌种。确定了发酵底物配方。完成了 包括层析法、去杂蛋白法的全部工艺。采用粉状于瓶中保存。 三、专家验收评价意见 (一)从140多个大豆品种中筛选了三个SOD 含量较高的品种, 确定“ NBT”法为大豆SO D最佳检测方法,完成了以“二法”处理大豆, 以中等 药制剂为沉降剂相配套的大豆SOD提取工艺研究,使大豆SOD口服液活性达 到108um/ml。精品活性为190um/ml。在实验室生产出大豆SOD复合物 50kg。 (二)研究确定了大豆发芽的最佳发芽期,筛选驯化了发酵剂,设计了 配方,制得的吉林酸豆奶消除了豆腥味,活菌数达到106个/ml以上,并 含有SOD。该技术通过农业部鉴定。 (三)研究筛选、鉴定了特定菌种RT-3,制成了风味较好的丹贝食品, 其消化率为94%,原种利用率为80%。建立了免疫检测系统,并首次证明 产品中含有异黄酮和SOD。该技术通过部鉴定。 (四)利用微生态益菌发酵大豆粉提取SOD研究筛选了菌株4个,确定了 配方,提取精品5g,活性达到3800~4000um/mg,并在樱桃等4种果树 上应用,使果实中SOD含量提高15%~20%。 专题共开发新产品7项,研究新技术新工艺10项,申报专利4项,获专 利3项,通过鉴定2项,撰写研究论文40篇。签订技术转让合同9份, 成交 额74万元,综合经济效益达600万元。 专题主持单位:吉林省农科院 专题参加单位:南京、北京农业大学( 佚名)

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