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菌种是食用菌生产的基础,只有优良的菌种才可能有好的收成。菌种一般分为母种、 原种或栽培种3级。 无论制作哪一级菌种,关键应强调无菌观念,严格按照无菌技术要 求进行操作。 一、母种、原种、栽培种的制作过程 1.母种: 母种也就是一级菌种,它的制作大致经过以下几个过程:培养基配制--→培养基灭 菌--→子实体分离或菇木分离或孢子分离--→培养--→转管纯化培养--→母种。 ①母种培养基配制。应根据不同食用菌的不同营养需要配制不同的培养基。常用的 配方有:配方1:土豆葡萄糖琼脂培养基(简称PDA培养基):土豆(即马铃薯)200g、葡萄 糖20g、琼脂(凝固剂)20g:配方2:土豆蔗糖琼脂培养基(PSA培养基):土豆200g、琼脂 20g、水1000ml、蔗糖20g;配方3:土豆胡萝卜琼脂培养基(PCA培养基) :土豆20g、胡 萝卜25g、琼脂20g、水1000ml:配方4:土豆琼脂培养基(PA培养基):土豆250--300g、 琼脂20g、水1000ml。 ②母种分离。即通常将食用菌的子实体、土壤中的菌根、菌素分离或进行菇木分离 或担孢子分离,然后在培养基上培养,得到母种。 ③母种扩大培养。用上述方法得到的母种数量有限,往往不能满足生产上的需要, 因而需要通过接种来扩繁一批母种供生产用。 2.原种: 原种也叫二级菌种,是由母种接种到瓶子或塑料袋里,经培养后得到的菌种。制作 原种的目的,一是为了扩大种量,满足生产上的需要;二是让菌丝对各种秸秆类物质具 有适应能力,并在适应的同时产生各种酶类;三是在培养过程中还可以对菌种的生命力、 纯度等进行检验,存优弃劣。通过接种,一支母种可扩接3--5瓶原种。现简要介绍几种 原种培养基配方: ①锯末培养基:锯末(阔叶树) 78%、米糖(或麦麸)20%、糖(红糖或白糖,下同)1 %、石膏粉1%,水适量; ②棉子壳培养基:棉子壳78%、麦麸或米糠20%、石膏粉1%、糖1%,水适量; ③锯末玉米粉培养基;锯末(阔叶树) 90%、玉米粉8%、糖1%、石膏粉1%,水适 量; ④稻草段培养基:稻草段78%、米糠或麸皮20%、石膏粉1%、糖1%; ⑤锯末、棉子壳混合培养基:锯末40%、棉子壳40%、麦麸18%、石膏粉1%、糖1 %,水适量; ⑥酒糟培养基:干酒糟40%、棉子壳(或锯末)40%、麦麸18%、石灰1%、糖1%, 水适量。 3.栽培种: 栽培种是直接用于生产栽培的菌种,也叫三级菌种或生产种。栽培种比原种的需要 量更大,所用的培养基配方和制作方法与原种相同,将发满瓶的原种,接种到栽培种瓶 子或薄膜袋里即可得到栽培种。一般每瓶原种可扩接60--100瓶栽培种。 二、菌种生产所需的条件 1.无菌室: 无菌室一般不宜过大,4--6平方米即可。与无菌室相连还应有一个1--2平方米的缓 冲室相配套。可用药品或紫外灯对其杀菌消毒。 2.无菌箱: 也叫接种箱。 大小和规格依具体条件而定,有单人式、双人式、4人式等。一般双 人操作式较为普遍。农村专业户可以制作一个单人操作式。 3.接种工具; 常用的接种工具有酒精灯、接种器等。接种器包括接种铲、接种勺、接种钩等。 4.药品: ①酒精。除供酒精灯燃烧用外,主要用于手、接种器的消毒。 ②甲醛。一般配成37%的溶液即福尔马林用于接种箱的消毒。 ③石碳酸,也叫苯酚,常用5%的水溶液进行接种箱和无菌室的喷雾消毒,或配成0 .5%--1%的溶液,用于洗涮器皿、桌面和工作服,以达到消毒目的。 ④漂白粉。常用10g漂白粉加水140ml,静止1--2小时后取上清液,用喷雾消毒无菌 室。 ⑤新洁尔灭。 常用0.25%浓度溶液进行皮肤和不能以高压灭菌的器具的消毒,也 可用于接种箱和无菌室的喷雾消毒。 三、消毒与灭菌 因为自然界里到处有微生物的存在,如空气、所有原料、水以及一切用具和器具的 表面,这些微生物对食用菌菌种而言,都属于有害菌,即通常所说的杂菌。我们制作的 菌种,要求绝对不能染上杂菌,所以必须进行严格灭菌。 1.加热灭菌法: 近年来普遍使用的一种方法是常压一次灭菌法,所需设备简单、投资少、成本低, 适合我国农村使用。此法只要砌一个锅灶,买一口大锅,做几个蒸笼就可以了。把待杀 菌的物品放入蒸笼里,从上气开始,保持蒸煮6--8小时,即可达到灭菌的目的。 2.紫外线灭菌法: 开紫外灯30--40分钟,基本上可达杀菌目的,距照射物的距离以不超过1.2m为宜。 注意紫外线对人体有伤害作用,所以不能用眼睛直视开着的紫外线灯,也不能开着灯工 作。 刘丹艳(湖南省长沙市湖南农业大学园艺系,邮编:410128) 摘自2003年第8期《农家致富顾问》 ( 佚名)
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