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日前,在蜜环菌母种制作过程中,不管是菌种制作厂家还是天麻种植者,大多采用传统的PDA、PDA加富、PDA+黄豆粉等培养基,这些传统的培养基有许多不足之处:①不能为蜜环菌提供充分的营养来源;②由于蜜环菌是喜湿性菌类,在培养基上更易于吸收游离态的水,但传统的琼脂培养基以结合态水为其主要存在形式,因此不能很好地为其提供所需的水分,致使蜜环菌的生长受到一定的抑制;③在琼脂培养基上,很容易产生褐化及蜜环菌的角质化(都是蜜环菌退化的标志);④在偏远地区,由于难于买到琼脂,生产者想要制作母种,必然会受到很大限制。笔者针对以上这些缺陷,经过长期的培养基优选试验,总结出简易的蜜环菌母种制作技术,该法不需琼脂,但能克服以上缺点。现将制作技术介绍如下: 1.培养基配方。玉米粉120克,黄豆粉20克,蔗糖(白糖)20克,水1000毫升。 2.培养基制作。先将称量好的玉米粉、黄豆粉用适量水调匀,再添足水煮制,待煮沸时开始记时,保持35分钟即可,注意在加热过程中需不时搅拌,以免煮糊,注意添水,以补充加热过程中损失的水分。 煮好后加入所需的蔗糖,趁热采用注射筒或其他装置分装,分装后塞好棉塞,将试管竖直放置。由于该培养基营养相当丰富,再加上玉米粉彻底灭菌相对较难,因此灭菌时间应比常规培养基稍长一点,一般将其控制在高压条件下(1.5千克/平方厘米)灭菌35分钟--40分钟、常压灭菌60分钟--90分钟即可。灭菌完成后,待冷却至试管不烫手时将其取出,竖直放置(蜜环菌母种培养基一般做成柱式),待完全冷却后,培养基在试管内就彻底凝固了。 3.接种培养与保藏。在无菌条件下,每支试管接入一豌豆粒大小的菌种块,所接菌种必须保证具有生活力,培养基褐化、菌素严重角质化的菌种勿用。接种后置于25℃温度下避光培养,一般在7天--10天后,菌丝即可满管。菌丝满管后将菌种放于冰箱中冷藏,一般可保存半年至一年,若需长时间保藏,可将试管口蜡封。 采用以上方法制作母种,具有以下优点:①制种原料简单、易找,制种技术简便、易操作,制作成本低廉。②由于培养基改善了水分的供给状况,且营养相当丰富,再加上玉米粉、黄豆粉中含有多种生长因子,因此所制母种菌索粗壮、浓密、洁白、不易褐化、角质化,具有相当强的抗衰老、抗退化能力,对严重衰老、退化的菌种也具有相当强的复壮能力。③该方法制作的母种还可大大延长保藏时间,减少了保存过程中的转代次数,对抑制菌种退化可起到很大作用。④该方法制作的母种生活力旺盛,转接到母种、原种或栽培种培养基上的菌种块萌发快,生长速度明显快于常规方法所制作的母种。( 佚名)
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