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组织培养的培养技术

网络　 2006-08-13 　 　

1、取材 植物体的各个部位皆可培表，但根据需要培养的难易，对不同植物则有所区别。茎尖是利用最多的部位。根据不同的需要还可取叶片、花、花梗或花梗腋芽、根、茎等。通常应改初生幼嫩的材料，其分生能力强。 2、消毒 组织培养用的材料大多取自田间，带有大量杂菌，这是无菌培养的大障碍，为此，需严治地进行消毒灭菌。取材后先将泥土洗净，再在自来水中冲洗10～2O分钟，然后转入无菌条件（超净台或接种箱内）进行消毒（见表）。 3、接种培养 接种的培养材料在消毒滤纸上切成所需大小，通常约几毫米大小，中国兰花茎尖应在0.2毫米以下，为此，需在解剖镜下操作。工具用完即应在95%洒精中沾一下，然后用火焰消毒法消毒，避免工具带菌造成交叉污染。材料接种后将培养瓶移入培养室，放在培养架上进行培养。┌────┬─────────────────────────────┬──────┐│组织 │消毒顺序 │备注 ││ ├──────────┬─────────┬────────┤ ││ │消毒前 │消毒 │ 消毒后 │ │├────┼──────────┼─────────┼────────┼──────┤│种子 │纯酒精中浸10分 │10％次氯酸钙浸 │九菌水洗3次，在 │用幼根或幼芽││ │钟，再用无菌水漂 │20～30分钟，再用 │无菌水中发芽。或│来产生愈伤组││ │洗 │1％溴水浸5分钟 │用无菌水洗5次。 │织 ││ │ │ │在滤纸上发芽 │ │├────┼──────────┼─────────┼────────┼──────┤│果实 │饨酒精迅速漂洗 │2％次氯酸钠浸10 │无菌水反复冲洗，│获得无菌苗 ││ │ │分钟 │再剖除种子或内部│ ││ │ │ │组织 │ │├────┼──────────┼─────────┼────────┼──────┤│茎切段 │自来水洗净，再用 │2％次氯酸钠浸15 │无菌水洗3次 │直立在琼脂培││ │沌酒精漂洗 │一30分钟 │ │养基上或切取││ │ │ │ │出组织进行培││ │ │ │ │养 │├────┼──────────┼─────────┼────────┼──────┤│贮藏器官│自来水洗净 │2％次氯酸钠浸20 │无菌水洗3次、滤 │从消毒材料向││ │ │～30分钟 │纸吸干 │都取出组织来││ │ │ │ │培养 │├────┼──────────┼─────────┼────────┼──────┤│叶片 │自来水洗净，吸干， │0.1％氯比汞浸1 │无菌水反复冲洗，│选用嫩叶，叶││ │再用纯酒精漂洗 │分钟或2％次氯酸 │滤纸吸干 │片平放在琼脂││ │ │钠浸15一20分钟 │ │上，或叶片插││ │ │ │ │在琼脂中 │└────┴──────────┴─────────┴────────┴──────┘(王怀宇)（ 佚名）

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