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一种采用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂防治果树根癌的方法

网络　 2006-08-15 　 　

一、概述 本项目以壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂为核心技术，计划进行防治果树根癌中试研究，解决现有国内外生防药物只能预防根癌、不能治愈根癌的难题。目前已研发的三项相关防治技术，经樱桃树根癌防治试验，当年治愈率99%，二次感染率和3年复发率均为零。经科技成果鉴定。三项技术均居国际领先水平，可广泛用于樱桃、苹果、梨、桃、葡萄等各种果树的根癌防治，促进我国果树栽植业的健康发展。 二、果树根癌及其防治现状 果树根癌又称冠瘿病、根头癌肿病，是由土壤根癌杆菌引起的一种世界性病害，这种细菌寄生范围广，可侵染93科331个属643个种的植物。樱桃树根癌由根癌土壤杆菌经伤口侵入细胞组织引起染色体变异，使细胞分裂失控，形成根瘤而严重影响根部生长。根癌病主要发生在根颈部，也发生于侧根和支根，在嫁接处较为常见，症状表现为瘤大而硬，木质化。由于根部发生癌变，水份、养分流通受阻，根势日衰，叶薄、细瘦、色黄，严重时干枯死亡。目前，国内外学术界经大量研究，主流意见是果树一旦染上根癌则无法治愈[1]；防治上强调以预防为主，即选用健康的苗木，栽培时尽量避免根系受伤。对于已经出现症状的植株只能用先刮除肿瘤后再保护伤口的方法来减轻危害[2]。在生物防治方面，澳大利亚学者Kerr 1972年用放射土壤杆菌Agrobac terium Radioba CterK84菌株对核果类果树根癌进行了生物防治，防效率90.5%-100%[3]。K84在世界上不少国家广泛应用推广，我国的研究者引进了K84进行研究，先后研发出根癌宁[4]、抗根癌菌剂[5]、WJ-K84-1[6]等农杆菌素，均有不同程度的防治效果，但均无治愈报道。这是因为，这些以生防菌株防治根癌的机理是由于以菌株抢占果树伤口位点，在其上定殖并产生农杆菌素，阻止病菌从伤口侵入，它的作用是预防而不是治疗，因此治疗效果较差[7]。而且，这些生防菌株并不是对所有果树根癌都是有效的，它们只对侵染核果类苹果、梨、柿等含有胭脂碱Ti质粒的生物Ⅰ型、生物Ⅱ型根癌土壤杆菌具有防效，对含有章肉碱Ti质粒能引起葡萄根癌的生物Ⅲ型根癌菌是无效的[8]。即使K84等农杆菌素对生物Ⅰ型、生物Ⅱ型根癌土壤杆菌具有防效，但由于这些农杆菌素过于娇嫩，开启时间过长、过冷、过热，都会使它的防效大打折扣，甚至于失效。 与国内外同类产品相比，本技术产品作业条件宽松，作用持久，它由表及里，内外兼治，尤其重在治愈而不是只能预防不能治愈。本技术产品还强调采用多种生物农药协同治理，而不是仅仅采用单一药物。凡此种种，都与国内外同类产品产生了明显的区别，请见下表：本项目与国内外同类产品现行指标比较如下：产 品降低发病率治愈率说 明K84（澳大利亚）Kerr90.5%～100%未见报道发病后不能治愈，而且对根癌土壤杆菌Ⅲ型菌株无效抗根癌菌剂(中国农业大学)90％以上同上同上根癌宁（上海农科院园艺所）90%以上同上同上WJ-K84-1（中国辽宁师范大学）83.4％同上同上壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂（本公司）100%99％以上对各型根癌土壤杆菌均有显著杀灭作用 三、项目创新点 土壤根癌杆菌（Agrobacterium tumefaciens），通过伤口侵入寄主，将其诱癌质粒（Ti-Plasmid/Tumor induced Plasmid）上的一段产生植物生长激素的T-DNA整合到植物的染色体DNA上，随着植物本身的生长代谢，刺激植物细胞异常分裂和增生，形成癌瘤。一旦有根癌症状出现，就证明细菌的T-DNA已经整合到植物的染色体上，再用一般杀细菌剂已无法抑制植物细胞的增生，也无法使癌瘤症状消失，同样也不能阻止癌瘤的发展和增大。几十年来，国际学术界主流意见是，果树一旦染上根癌就无法治愈。对于已经出现症状的植株只能使用先刮除癌瘤再保护伤口的方法来减轻危害[9]。 能否治愈根癌，关键是能否找到适症的高效药物，以及科学的综合治理方法。2002年，我们对壳寡糖进行化学改性研究。壳寡糖是国际学术界公认的具有特异性抑菌、诱抗作用的海洋生物活性物质。壳寡糖上的氨基在pH〈6的溶液中带正电荷，其抑菌性明显依赖于它们的脱乙酰度、分子量、水溶液的浓度以及水溶性分子中NH3+离子的稳定性[10]。随着脱乙酰度的增大，其分子链上的正电荷NH3+也增多，其抑菌作用就增强。郑连英[11]考察了不同分子量的壳寡糖的抑菌作用，对于革兰氏阴性菌，随壳寡糖的分子量减少，抗菌性能增强。它分子量越小，越容易进入细胞壁的空隙结构内，干扰细胞的新陈代谢，达到杀菌目的。Simpson等[12]发现要抑制革兰氏阴性菌的生长只需要0.0075%的壳寡糖。Hirano和Nagao[13]研究了壳寡糖的聚合度与抑制效果之间的关系：壳寡糖以及低分子量的壳寡糖比高分子量的壳寡糖对包括Fusarium oxyporum,Phomopsis fukushi,Alternaria的抑制作用更强。 近年来，国内外对壳寡糖诱导植物抗病反应机理研究比较多。Elghaouth等[14]指出，壳寡糖可诱导植物中的几丁质酶和β-1，3-葡萄糖酶活性的提高。几丁质酶广泛存在于自然界中，在高等植物中主要分布于植物的茎、叶、种子的愈伤组织中，此酶常与防卫反应的诱导有关。几丁质酶是一种糖苷酶，主要催化几丁质的水解，具有几丁质外切活性和内切活性，可水解几丁质内部的1，4—糖苷键，释放寡糖，许多纯化的几丁质酶还显示不同程度溶菌酶活性，本身具有抗真菌的作用。张燕等[15]认为壳寡糖能强烈诱导小麦叶片过氧化物酶（PAL）和苯丙氨酸酶（POD）的活性。研究表明：PAL和POD等酶在植物的抗病反应中起着十分重要的作用。PAL 是酚类物质、植保素、木质素等抗菌物质合成过程中的关键酶，可作为植物抗性的一个生理指标。POD在木质素合成和酚类物质氧化过程中起着重要的作用，因此这些酶的活性的提高对植物的抗病能力的增强是十分有利的。植物的苯丙烷类代谢途径是植物体内次生物质代谢的一条重要途径，经壳寡糖处理，可以诱导植物PAL活性，从而激发苯丙烷类代谢，产生酚类和异黄酮类植保素以及木质素，在植物抗病过程中起化学屏障和植物抗毒素的作用。 壳寡糖的抑菌、诱抗作用最主要的因素是能否在溶液中形成稳定的NH3+离子。现在市场上销售的壳寡糖抗病害产品大多是采用乙酸溶液。严俊和徐英南[16]研究了壳寡糖在微酸性水溶液中的稳定性及影响因素。其实验表明，在乙酸、苯甲酸、甲酸、乳酸、氯乙酸五种酸中，无论是保温放置还是室温放置，其粘度都有较大幅度的下降，但与有机酸的酸性无对应关系。壳寡糖在乙酸中降解最严重。室温下60天其粘度下降了56%。壳寡糖在甲酸中降解最少，下降了28.8%。另外蒋挺大[17]研究发现，1%的乙酸壳寡糖溶液中观察不到NH3+离子的吸收峰，因此可以认为乙酸作为介质，壳寡糖只是溶解，并未形成NH3+离子，未充分发挥壳寡糖的抑菌作用。这样，就很有必要找到一种既能溶解壳寡糖，又能使其形成稳定的NH3+离子，而不易降解的介质。 通过理论分析以及大量的实验，我们找到了柠檬酸作为介质。柠檬酸作为有机酸，有其特殊的结构及作用方式。其分子中有三个羧基和一个羟基，既属于α-羟基酸又属于β-羟基酸，酸性较强，1%的溶液pH值为3.11。由于其属于三元酸，与壳寡糖能稳定地结合生成NH3+离子，形成壳寡糖柠檬酸盐，而又不易降解。实验表明，本产品由2%的柠檬酸溶解的2%壳寡糖柠檬酸盐，在一年时间内的降解量仅为1%，而相同浓度的乙酸壳寡糖、溶液中的壳寡糖降解量为80%。我们为了提高产品的稳定性，又加入了抗氧化和抗紫外线能力较强的Vc、山梨酸甲和稳定剂二胺四乙酸二钠盐，实验表明其在一年的时间内其降解量≤1%。 最终，我们经过大量对比试验，选择了脱乙酰度>93%，分子量1500的壳寡糖作为原料，以柠檬酸作为介质，研发出了新的壳寡糖羧基化衍生物壳寡糖柠檬酸盐，研发出壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂及其相关技术。它之所以能够治愈根癌，是抓住了根癌三个弱点：一是根癌土壤杆菌只能从果树根系伤口侵染，二是它的致瘤基因蛋白质合成一旦受阻就会抑灭，三是它在PH值5.7以下时就无法存活。针对这三个弱点，壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂的六种作用多管齐下，达到显著治愈效果。 ——一是抑制细菌繁殖，引起果树根癌病的根癌土壤杆菌是一种革兰氏阴性土壤杆菌。壳寡糖柠檬酸盐的C位氨基不但赋予了其抗菌性，而且壳寡糖这一带有正电荷的阳离子与微生物细胞壁的磷脂类等阴离子相互吸引，束缚微生物自由度，阻遏有害真菌繁殖。不仅如此，壳寡糖还可被微生物细胞吞噬，使微生物的DNA（去氧核糖核酸）向RNA（核糖核酸）转录，使蛋白质合成受阻而抑制病菌繁殖，表达出对真菌、细菌和病毒的抑灭。壳寡糖柠檬酸盐PH值≤5，它涂抹在根系伤口上，浇灌于果树根部土壤中，根癌土壤杆菌无法存活。它的残液还能抑灭土壤中有害霉菌和丝状真菌，并大大增加有益微生物固氮菌、纤维分解菌、乳酸菌、放线菌的数量，从根基上保证果树健康生长。 ——二是诱导产生抵御病原物质的抗性蛋白---致病相关蛋白PR(pathogenesis-related proteins)[18]。这是壳寡糖及其衍生物在植物抗病害方面比较独特的一点。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂所诱导的抗性蛋白主要为植物抗毒素、几丁质酶、壳聚糖酶和β-1、3-葡聚糖酶等。植物抗毒素是一种低分子质量化合物，具有明显的抗微生物活性，对植物有保护作用。几丁质和葡聚糖是真菌细胞壁的主要组分。几丁质酶与β-1、3-葡聚糖酶的共同作用，可分泌到细胞壁间，集聚在细胞内的液泡中，构成了对真菌侵染的防线。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂所诱导的抗性蛋白几丁质酶、壳聚糖酶和β-1、3-葡聚糖酶彼此之间还有协同效应，因此抗菌作用更为明显。 ——三是它能够诱导木质素的形成和酚类代谢。木质素是由多种苯基类丙烷醇缩合而成的多聚物，是植物维管组织次生细胞壁的主要组分，决定细胞壁的强度和刚性。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂可诱导植物在病菌侵染点周围产生木质素，形成一个物理屏障，从而阻止和延迟病菌的生长和扩散，增强植物的抗病力。同时，它能促进植物的酚类代谢，在植物的病菌侵染点处，杀菌性物质酚类（单宁、绿原酸等）物质大量积累。植物体内酚类的增多，不但自身可以抗病，而且还可促使病原侵染处木质化，增强植物的抗病能力。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂诱导的细胞中酚类组成会迅速变化，苯丙烷、香豆酸和绿原酸等都明显增加。 ——四是它能够保护伤口，防止病菌二次侵染。国内外有关学术界公认，伤口是根癌土壤杆菌侵染植株的唯一途径，保护伤口是最好的防治[19]。以往，人们的防护方法是，在用快刀彻底切除病瘤后，用硫酸铜溶液、抗菌剂402溶液消毒切口，或者用400单位链霉素涂抹切口，外加凡土林保护等等。果农们大量实践表明，这些方法缺乏显著的防护作用，而且往往会导致抑制生长、烂根等副作用。我们选用的是壳寡糖的“亲族”中的羧甲基壳聚糖，将它与海藻酸形成一种共混膜，具有良好的抑菌、成膜作用，能够吸附在病菌细胞膜表面，改变细胞膜的通透性，致使病菌细胞质流失、细胞质壁分离而起到抑菌作用；它还能够渗透进入病菌细胞体内吸附细胞内带有负电荷的细胞质，发生絮凝作用，扰乱细胞正常的生理活动，或阻断病菌体内DNA的转录而抑制病菌的繁殖[20]。羧甲基壳聚糖与海藻酸的共混膜有较强的张力和韧性，可保持4周，6周后完后降解。我们利用它的这些特性，在伤口表面涂刷成膜，成为一层人工药膜，在新的根皮长出之前，它既能抑制土壤中细菌的侵染，又能保护伤口并促进伤口愈合。伤口愈合后，它也慢慢降解，成为优质有机肥而被根系吸收。 ——五是它能诱导植物产生愈创葡聚糖，促进伤口愈合。愈创葡聚糖是一种富含β-1、3-葡聚糖酶的多聚糖，植物受到病原侵害时，常在细胞间沉积愈创葡聚糖，从而将受菌感染的部位与正常的细胞分隔开，与木质化一样，形成物理屏障，使病原菌不能扩散到未受感染的组织而起到抗菌作用。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂可诱导植物产生愈创葡聚糖而免受病原菌的侵害。还可使细胞壁显著加厚，包间被填塞，在病菌侵入处形成大量乳头状突起，病原菌被包埋在致密的颗粒状物质中，不能进一步扩散。同时，它能促进根系细胞分化、加速受伤组织愈合。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂，能够借助柠檬酸与植物的天然亲和力，迅速渗透到植物毛孔和细胞隙，使植物细胞再生速度加快。它在短时间内穿过环境相，渗透到植物的生物运动相、生物动力相，在根系内传导、分布、积累、代谢，刺激初生构造和次构造的任何部位，如骨髓、次生韧皮部，或次生木质部中的薄壁细胞，加速DNA向RNA的转录，从而加速细胞生长，促进细胞分裂。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂能使这一过程提高8-10倍甚至更多。在壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂的作用下，受伤部位4天内就能快速形成创伤木栓形成层。它们最初围绕在伤口和纤维周围的薄壁细胞，分化成封闭的小圆圈式的木栓形成层，并向圆圈中央部分逐渐分生木栓细胞，把伤口塞住。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂能快速进入木栓形成层的薄壁细胞内，使细胞壁纤维素结构间的交织点断裂，联系松弛，引起吸水而使细胞的体积加大进行分裂，由内分裂形成栓内层，向外分裂形成木栓层，此过程约8天就可完成。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂进一步促进两个初生木质部之间的薄壁组织细胞开始分裂活动，形成维管形成层的一部分，随着细胞的分裂，各段维管形成层逐渐向两端扩展，并向外推移，直到初生木质部的辐射角外与其外侧的中柱鞘细胞相接。此时，这些外部的中柱鞘细胞也恢复分裂能力，并分别与最初形成的维管形成层相连合，成为一个完整的连续的呈波浪状的形成层，包围着初生木质部。出生韧皮部内侧的形成层被新形成的组织推向外方，促进形成层进行平周分裂，向内分裂产生细胞，分化出新的木质部。加在初生木质部的外方，为次生木质部；向外分裂产成的细胞，分化出新的韧皮部，加在初生韧皮部的内方，为次生韧皮部，约15天形成维管组织，基本分生组织形成皮层，约20天根系恢复正常生长。 ——六是壳寡糖柠檬酸盐能够显著激活植物的生长基因，增强作物吸收营养能力和光合作用，迅速康复，茁壮成长。2004年春夏之交，我们在大连甘井子区红旗街道岔鞍村进行防治樱桃根癌试验中发现，这里的樱桃不但根癌病严重，还受到了矮壮素PP333药害，既不长枝，也不展叶。经过壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂处理，仅仅两个月时间，根系发达，枝长叶茂，焕然一新。大连诸地历时3年试验证明：在治愈樱桃树根癌的同时，枝粗、植株开张度、座果率、果实含糖量、酸度、商品形状明显优于未经处理的对照组，增产15%以上。 综上所述，本项目创新点如下： 1、理论创新。使用国内外现有的各种农杆菌素，只有预防作用，它们对于已侵染根癌的病树是没有治愈可能的。因此，新的生防药物不仅要能够直接抑灭根癌土壤杆菌，还能够诱导果树产生抗病基因，在内部表达出对病菌的抑灭。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂及相关防治技术阐明了它在抑制细菌繁殖、诱导产生抗性蛋白、木质质、酚类物质、愈创物质等新的作用原理、作用机制，解决了目前生防药物、化学药物不能治愈果树根癌的世界性难题。 2、技术创新。首先，通过化学改性处理，首次研发出新的壳寡糖羧基化衍生物壳寡糖柠檬酸盐，显著提高了壳寡糖的抑菌性，稳定性和诱抗能力。其次，首次采用海藻卤素过氧化物酶E，将无机碘催化成为生物活性有机碘，进而研发出海藻精植物免疫增产调理素，植物对生物活性有机碘的吸收率是无机碘的3倍，作用效果是无机碘的30倍，能够激活植物免疫系统，强化其抗病性。再之，还首次将羧甲基壳聚糖用于果树根癌述后伤口保护，借助其成膜性、抑菌性、可降解性，阻断了根癌土壤杆菌从伤口侵染植物这一唯一途径，有效防止了病菌二次侵染，促进了伤口愈合。 3、结构创新。本项目研制的海藻精植物免疫增产调理素、壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂、羧甲基壳聚糖防护剂在防治果树根癌上既各司其职，又协同作用，构成了一组环环相接、密切协作的防治结构。海藻精植物免疫增产调理素既能直接抑灭根系伤口、土壤的根癌土壤杆菌，又能为果树提供丰富养份，提供了一个良好的外部环境；壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂诱导果树产生抵御病原物质的抗性蛋白、愈创葡聚糖、木质素和酚类代谢，显著增强了对根癌土壤杆菌的内抗性；羧甲基壳聚糖防护剂为术后根系“穿”上了一套抑制病菌侵染、促进伤口愈合的“防护服”。它们构效关系合理，内外呼应，产品结构和技术结构达到合理的组合。 4、工艺创新。在壳寡糖化学改性处理中，首先将防腐剂山梨酸钾与抗氧化剂Vc、稳定剂二胺四乙酸二钠盐依次溶解至壳寡糖溶液中，再于搅拌状态下溶入柠檬酸溶液，化解了山梨酸钾与柠檬酸同时使用结晶絮凝的工艺难题，壳寡糖一年内降解量≤1%。在海藻精植物免疫增产调理素研发中，自行研制了具有人工海水环境的多功能酶动力反应器，在特定温度、压力、流速、营养盐含量、PH值等条件下，使海藻卤素过氧化物酶E以其高活性将无机碘催化成为生物活性碘，收率、纯度均达99%以上。 大量的田间试验证明了壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂及相关技术的显著效果。2003年，在大连甘井子区5000亩农田推广应用壳糖胺植物抗病害增产剂示范工程中，在大连辛寨子镇前革村果树精品园进行了防治果树根癌试验。该果树精品园将患有根癌病的樱桃树都已经移植在苗圃边缘。试验设试验组、对照组。试验组130株樱桃树根癌根茎表现为褶皱状堆垒，形状象榨菜。根据专家指导，农业技术人员先散开树盘表土，露出树根，将瘤状病部用快刀剔除，然后用海藻精植物免疫增产调理素1000倍溶液+壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂500倍溶液、羧甲基壳聚糖50倍溶液依次涂抹在伤口上，控3-5天后，用海藻精植物免疫增产调理素1000倍溶液、500倍壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂溶液浇淋1次，水渗净后再封土复原。20天后，试验组全部成活，树根伤口完全愈合，长出了新根皮和新根系，树上部分枝壮叶茂。而未经处理的对照组有的已经死亡，未死的也萎蔫不振。随后，该果树精品园又进行了扩大试验，治愈率均为100%。2005年5月，我们又去了现场，试验组樱桃树长势茁壮，还挂了果。2004年，大连兴安开发公司进行了防治樱桃树根癌试验。该公司300多亩樱桃树苗木根癌发病率35%以上，每年都死掉一部分树。他们采用与前革果树精品园相同的方法进行处理，到今年，试验组病树全部成活。2004年冬天格外寒冷，但没发现一棵树冻死，2005年有的果树还挂了果。 四、项目技术方案 在大量试验的基础上，我们总结出了一整套防治果树根癌的技术方案。 1、樱桃树根癌防治 （1）、试材：采用大连保绿宝海洋生命科学研发中心有限公司生产的壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂“魔方1号”、海藻精植物免疫增产调理素、羧甲基壳聚糖防护剂以及该公司引进的其它辅助性药物消毒立逃；品种：中、晚熟品种；底肥：经充分发酵熟透的农家肥，加入1000倍“魔方1号”。 （2）、针对不同的防治对象，所采用的方法具体如下： 防治时期：定植前 病症表现：无明显病症表现，但土壤中存在的根癌土壤杆菌会从移植时根系外伤、嫁接口侵染植株。 防治方法：定植前用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂500倍+海藻精植物免疫增产调理素1000倍混合液集中苗木浸泡6小时。 防治时期：定植后 病症表现：①、树干表现为所分泌的树脂在干燥后呈灰褐色凹陷，后期表皮呈疣瘤状，发病的一侧新叶萎蔫甚至枯死； ②、根茎表现为褶皱状堆垒，形状像榨菜。 防治方法： ①、树干病症的刮皮涂药方法为：先将发病部位用刀刮掉，露出形成层而不伤，如果形成层已经染病黑化，那么黑化多大部位，则刮掉多少。在病斑上部向健康部位多延长1～2厘米，向病斑下方健康部分多延长2～3厘米。其防治方法如下： 配方：海藻精植物免疫增产调理素1000倍+消毒立逃500倍+壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂500倍混合溶液，羧甲基壳聚糖防护剂50倍，依次涂刷到病斑上。 ②、对根基榨菜状病瘤处理：应先散开树盘表土，露出树根，将瘤状病部用快刀剔除，然后用海藻精植物免疫增产调理素1000倍+消毒立逃500倍+壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂500倍液混合涂刷，稍控干后用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂500倍：羧甲基壳聚糖防护剂50倍涂刷。控3～5天后，再按海藻精植物免疫增产调理素1000倍+壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂1000倍浓度浇一次，水渗净后再封土复原。刮掉的根癌病变部分焚烧干净。 ③、果收后入秋前或早春施肥时，加入占底肥总量1/3～1/4活性生物菌肥，其农家肥必须经充分发酵，将壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂1000倍液喷于发酵后的基肥中，改善根际土环境。 2、苹果树根癌防治 （1）、试材：采用大连保绿宝海洋生命科学研发中心有限公司生产的壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂“魔方1号”、海藻精植物免疫增产调理素、羧甲基壳聚糖防护剂以及该公司引进的其它辅助性药物抗菌剂“402”、五氯酚钠。 （2）技术方案 防治时期：定植前 病症表现：无明显病症表现，但土壤中存在的根癌土壤杆菌会从移植时根系外伤、嫁接口侵染植株。 防治方法：移植前用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂500倍+海藻精植物免疫增产调理素1000倍混合液集中苗木浸泡6小时。 防治时期：定植后 病症表现：主要发生在根茎部或根系的其它部位，也常见于嫁接处，初期病部形成灰白色大小不等的瘤状物，内部组织松软，外表粗糙不平，瘤体不断扩大，表面逐渐变为褐色至暗褐色，内部木质化，癌瘤多为球形或扁球形，往往在癌瘤表面和周围长出一些细根，而侧根、须根则会减少。 防治方法：扒开土壤，露出树根，用快刀切除病瘤，并向健康部位多延长切削1～2厘米，然后渐次用海藻精植物免疫增产调理素800倍、壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂500倍、羧甲基壳聚糖50倍液涂抹在伤口表面，稍控干后用海藻精植物免疫增产调理素1000倍+抗菌剂“402”2000倍或五氯酚钠150倍进行土壤消毒。刮掉的根癌病变部分焚烧干净。 3、梨树根癌防治 （1）、试材：采用大连保绿宝海洋生命科学研发中心有限公司生产的壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂“魔方1号”、海藻精植物免疫增产调理素、羧甲基壳聚糖防护剂以及该公司引进的其它辅助性药物消毒立逃、抗菌剂“402”。 （2）技术方案 防治时期：定植前 病症表现：无明显症状表现，但根癌土壤杆菌会从移植时的根系外伤外、嫁接口侵染植株。 防治方法：定植前用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂500倍+海藻精植物免疫增产调理素1000倍+抗菌剂“402”800倍混合液，集中苗木浸泡6小时。 防治时期：定植后 病症表现：主要发生在根颈部，也发生于侧根和支根，肿瘤多呈半圆或近半圆形，瘤大而硬，木质化，初生时乳白色或略带红色，光滑、柔软，后逐渐变褐色乃至深褐色，表面粗糙或凹凸不平。 防治方法：先散开树盘表土，露出树根，用快刀将病瘤剔除，用海藻精植物免疫增产调理素1000倍+消毒立逃或抗菌剂“402”800倍混合液涂刷；之后，渐次用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂500倍液、羧甲基壳聚糖50倍液涂抹。控3～4天后，再按海藻精植物免疫增产调理素1000倍+壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂1000倍混合液浇一次，水渗净后再封土复原。刮掉的根癌病变部分焚烧干净。 4、桃树根癌防治 （1）试材：采用大连保绿宝海洋生命科学研发中心有限公司生产的壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂“魔方1号”、海藻精植物免疫增产调理素、羧甲基壳聚糖防护剂以及该公司引进的其它辅助性药物硫酸铜、乙蒜素、盐酸环丙沙星、资氯酸钠、硫酸庆大霉素等。 （2）技术方案 防治时期：定植前 病症表现：无明显症状，已使用1-2年的苗圃地再育苗，定植后发病率90%以上。 防治方法：严格选择无病田建立苗圃地，严格选用无病接穗和插条，定植前用海藻精植物免疫增产调理素1000倍+硫酸铜100倍+壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂800倍集中浸泡6小时。 防治时期：定植后 病症表现：主要发生在根颈部位，有时也危害地上部的枝条和主干，肿瘤多为球形或扁球形，小的如核桃，最大的10厘米以上，每株瘤少则1-2个，多的可达几十个。初期病瘤为肉质，乳白色或略带粉红色，后逐渐变褐、变黑、木质化，表面粗糙不平。病瘤表面组织易破碎腐烂，有腥臭味，感病后侧根、须根减少。 防治方法：先散开树盘表土，露出树根，用快刀剔除病瘤，将海藻精植物免疫增产调理素1000倍+乙蒜素（或盐酸环丙沙星）500倍混合液、壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂800倍液、羧甲基壳聚糖防护剂50倍液渐次涂抹在伤口上。控2～3天后，用海藻精植物免疫增产调理素1000+乙蒜素800倍混合液浇灌，封土复原。刮掉的根癌病变部分焚烧干净。 5、葡萄树根癌防治 （1）、试材：采用大连保绿宝海洋生命科学研发中心有限公司生产的壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂“魔方1号”、海藻精植物免疫增产调理素、羧甲基壳聚糖防护剂以及该公司引进的其它辅助性药物抗菌剂“402”、福美双、消毒立逃、HLB-2细菌素等。（2）技术方案 防治时期：定植前 病症表现：无明显症状，病区引进的苗木和插穗、重荐果园易感染。 防治方法：用海藻精植物免疫增产调理素1000倍+福美双800倍混合液集中浸泡苗木和插穗8小时。 防治时期：定植后 病症表现：主要危害根颈处和主根、侧根及2年以上近地部主蔓，初期病部形成愈伤组织状的癌瘤，稍带绿色或乳白色，质地柔软，随着瘤体长变为深褐色，质地变硬，表面粗糙，瘤大小不一，有的数十个簇生成为大瘤，老熟病瘤表皮龟裂，易腐烂脱落，并有腥臭味。 防治方法：散开树盘表土，露出病根，先用快刀剔除病瘤，再用海藻精植物免疫增产调理素1000+消毒立逃（或抗菌剂“402”）800倍混合液进行伤口消毒，之后渐次涂抹壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂、羧甲基壳聚糖防护剂，稍控干后用海藻精植物免疫增产调理素1000倍+福美双800倍（或HLB-2细菌素800倍）浇灌封土。7～10天后，再用海藻精植物免疫增产调理素、抗菌剂“402”浇灌1次。刮掉的根癌病变部分焚烧干净。 五、社会效益、生态效益分析 我国是传统的世界水果生产大国，果树栽植业在我国农业和农村经济结构战略性调整中一直居于重要的优先地位。在果树的病虫害当中，根癌是最大的也是常有普遍性的顽症，严重制约了果树栽植业的健康发展。本项目的实施，有望从根基上解除根癌的重大威胁，保障果树的健康生长和新的果园的顺利开辟，成为我国农业和农村的一个蓬勃发展的优势产业。 本项目主要原料壳寡糖、羧甲基壳聚糖、海藻汁，取之于海产品加工的废弃物虾蟹壳、海藻加工的废水，变废为宝，可以带动水产品加工的发展，使自然资源不断得到合理利用。 本项目的实施，对农业生态环境和生态效益的积极影响比较突出。果树根癌土壤杆菌是土传加苗传的细菌性病害，可侵染93科331个属643个种的植物[21]，果园轮作几乎没有可能，因而根癌是避不开的顽症。根癌病随着苗木的调运在不断蔓延，重茬苗圃发病率在20%～100%之间不等。人们为了减少重茬引起的根癌病害而不断换用禾本科作物的耕地作为苗圃生产苗木，致使土壤污染面积不断扩大，严重影响果品生产和环境的绿化、美化。许多年来，国内外研究人员采用生防菌株K84等药剂进行生物防治，但只有预防作用，没有治愈效果，因此多采用化学农药进行防治，但化学农药作用十分有限，而且持效时间短、病菌易产生抗性，结果根癌病情越来越严重。本项目通过海洋生物农药壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂及相关防治技术的研发，以樱桃树根癌治愈率99%的实绩，找到了治愈果树根癌的重要突破口，可望全面带动各种果树根癌的有效治疗。在防治中，本项目的技术产品以新型海洋生物农药为主，使用中对人、畜、害虫天敌、土壤和环境无毒无害无副作用，可明显改良土壤，恢复生态平衡。 本项目的实施，还能够带动我国农业产业化水平、国际竞争能力以及农民收入的提高。果树栽植业是我国农业的重点产业之一，水果是国民重要食品，也是我国传统的大宗出口商品之一。根癌病害的发生和蔓延，严重制约了果树栽植业集约化、规模化发展，也严重影响了水果的产量和质量，不利于国民食品卫生和出口创汇。本项目研发的壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂及相关防治技术在樱桃树根癌的防治试验上证明，根癌当年治愈率99%，二次感染率为零，3年后复发率为零，植株开张度、座果率、果实含糖度、酸度、商品形状明显优于未经处理的对照组，增产15%以上。本项目实施中，随着各种果树根癌专用防治药物和技术的增多、试验示范面积的扩大，将在多品种、多地区带动果树栽植业产业化水平、国际水果市场竞争力的提高。同时，也将以优质高产而提高果农收入。按我国果树每公顷水果年销售收入12万元、平均增收10%计算，全国652万公顷苹果、梨、桃、葡萄、樱桃果园年增收可达782亿元，有力带动广大果农脱贫致富。（ 佚名）

华北地区常见玉米病害有 猪流感对症治疗措施 根结线虫病防治技术
黄瓜常见病害防治 蔬菜主要病害－辣椒病害 观赏凤梨的主要病虫害及
硫酸铜中毒的主要症状是 苦参碱（杀虫剂） 石榴病虫害防治历
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