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摘要:在大花蕙兰组培快繁过程中,植物激素对原球茎的诱导、增殖及幼苗的分化有显著影响。细胞分裂素6-BA和生长素N从最佳配比对大花蕙兰组织培养很重要,尤其是细胞分裂素影响较大。 关键词:大花蕙兰;组织培养;植物激素 大花蕙兰(Cymbidium)是兰科兰属中一部分大花附生种及其杂交种的统称,属复茎地生兰或半附生兰,原产地在喜马拉雅山脉及东南亚高山上,是世界五大重要商品兰花之一,近几年在我国花卉市场上流行的高档室内盆栽花卉,具有极高的观赏价值,株型高大雄伟,花大而多,色彩鲜艳。由于大花蕙兰多为杂交种,种子繁殖无法保持其品质特性,其结实率也相当低,分株能力弱,因而繁殖系数低,繁殖速度慢,远远不能满足商品化生产的需求,而采用组织培养方法进行原球茎增殖可以达到工厂化生产目的。试验研究植物激素对大花蕙兰组织培养快速繁殖的影响,并成功地建立了快繁体系,可以用于工厂化育苗。 1材料与方法 1.1材料 大花蕙兰采自河南农业大学兰花园中FN4品种,切取健康饱满10~15cm长的芽,剥去外部叶片直到5mm大小,消毒处理后作为外植体诱导材料。 1.2植物激素对原球茎诱导的影响 以MS为基本培养基,6-BA设0.5、1.0、1.5、2.0mg/L(单位下同)4个浓度水平,NAA浓度为0.2mg/L,培养基均附加香蕉汁100g/L,活性炭0.5g/L,每处理接10瓶,每瓶接1个茎尖,培养30d后,调查原球茎诱导率。 1.3植物激素对原球茎增殖及幼苗分化的影响 将诱导的原球茎分别接种于下列不同培养基中:①MS+6-BA1.0+NAA0.1;②MS+6-BA1.0+NAA0.5;③MS+6-BA1.5+NAA0.1;④MS+6-BAl.5+NAA0.5;⑤MS+6-BA2.0+NAA0.1;⑥MS+6-BA2.0+NAA0.5,以上培养基均加入香蕉汁130g/L,活性炭1.0g/L。每瓶接种10个原球茎,每处理10瓶,培养40d后,调查增殖系数及成苗数。 1.4植物激素对幼苗生根的影响 将原球茎增殖及幼苗分化培养中高于2cm的幼苗切出,转接到下列生根壮苗培养中:①1/2MS+6-BA0.1+NAA0.5;②1/2MS+6-BA0.3+NAA0.5;③1/2MS+6-BA0.5+NAA0.5;④1/2MS+6-BA1.0+NAA0.5,每种培养基均附加香蕉汁150g/L,活性炭1.5g/L。每瓶接20个幼苗,每处理10瓶,30d后统计生根率及生长情况。以上MS培养基中白糖浓度为30g/L,1/2MS培养中的白糖浓度为20g/L,琼脂为7g/L,pH值为5.3。培养条件:温度为24~26℃,光照强度为1000~1800lx,光照时间12~14h/d。 2结果与分析 2.1植物激素配比对原球茎诱导的影响 从表l可以看出,随着6-BA浓度的增大,原球茎诱导率逐步增高,在6-BA1.5时达到最大,6-BA浓度再增大,原球茎诱导率下降,生长中发现细胞分裂素低浓度形成原球茎慢,并且诱导出原球茎数目少,高浓度形成愈伤多,原球茎少。在培养基MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+香蕉汁100g/L+活性炭0.5g/L原球茎诱导率达到90%,并且每个茎尖分化出4~5个原球茎。 2.2植物激素对原球茎增殖及幼苗分化的影响 大花蕙兰原球茎在增殖的过程中有幼苗的分化,长时间不转接,会形成很多苗,因此增殖与幼苗分化同时进行。合理的激素配比会达到理想增殖与成苗。从表2可以看出,随着细胞分裂素的增大,原球茎增殖系数也增大,但幼苗分化数却随着降低,综合考虑增殖与成苗,培养基④最好,因此最佳增殖及幼苗分化培养基是MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L+香蕉汁130g/L+活性炭1.0g/L。 2.3植物激素对幼苗生根的影响 幼苗接在4种不同的生根培养基上均能生根,随着细胞分裂素浓度的增大,生根率逐渐降低,说明细胞分裂素对生根有一定的促进作用,但浓度加大引起增殖影响生根,培养基①生根率高,生根条数多,苗长得好。故生根壮苗最佳培养基是1/2MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L+香蕉汁150g/L+活性炭1.5g/L。 3小结与讨论 植物激素中的细胞分裂素6-BA和生长素NAA对大花蕙兰FN4组织培养快速繁殖影响很大。原球茎最佳诱导培养基是MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+香蕉汁100g/L+白糖30g/L+活性炭0.5g/L+琼脂7.0g/L,原球茎诱导系数可达到4~5。原球茎增殖及幼苗分化培养基是MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L+香蕉汁130g/L+活性炭1.0g/L+白糖30g/L十琼脂7.0g/L,探索最佳增殖与幼苗分化培养基中激素配比对大花蕙兰FN4工厂化育苗有很大意义。生根壮苗培养基1/2MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L+香蕉汁150g/L+活性炭1.5g/L+白糖20g/L+琼脂7.0g/L。推荐阅读:钻石玫瑰组培快繁技术研究如何规避罗汉果组培苗的种植风险唐菖蒲的特性、栽培和管理美人蕉的栽培管理技术( 田志强)
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